农杆菌介导的cry1A(c)和cry3Aa基因在烟草中的遗传转化及蛋白表达

论文发布时间：[2010-04-27] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：郭培鑫杨敏生霍雪梅肖凯

作者单位：河北农业大学林学院林业生物实验室

论文摘要：为构建含部分修饰的cry１A(c)和cry３Aa双基因植物表达载体，通过遗传转化获得同时表达Cry１A(c)和Cry３Aa毒蛋白的转基因烟草，以部分改造的cry１A(c)和cry３Aa基因为模板，通过设计特异PCR引物和亚克隆，将部分改造的cry１A(c)和cry３Aa基因构建至同一表达载体p１３０５-Cry１A(c)-Cry３Aa。以表达载体p１３０５-Cry１A(c)和p１３０５-Cry３Aa为对照，利用农杆菌介导法转化烟草，分别获得了转cry１A(c)、cry３Aa基因和同时转这两个基因的３种类型转基因烟草，并对转基因植株进行PCR和ELISA检测。PCR检测证实了cry１A(c)、 cry３Aa基因和cry１A(c)- cry３Aa双基因均已整合到烟草基因组中。ELISA检测表明，５株PCR检测阳性的转cry１A(c)和cry３Aa双基因烟草中，３株检测到Cry１A(c)蛋白的表达，平均表达量为０。０１４９％，最高表达量为０。０３０１％；５株均检测到Cry３Aa蛋白的表达，表达量在０。０００８％~０。２９３８％之间，平均表达量为０。１４９０％。用含双Bt基因植物表达载体转化烟草，获得了cry１A(c)和cry３Aa共同表达的转基因植株。

关键词： cry1A(c) cry3Aa 植物表达载体转基因烟草抗虫蛋白表达

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