所有作者:吴玮玮 陈宝安 程坚 高峰 许文林 宋慧慧 鲍文 孙茜 孙新臣 刘莉洁 夏国华 李小毛 王雪梅 朱晗
作者单位:东南大学附属中大医院血液科
论文摘要:本实验旨在研究四氧化三铁纳米颗粒(Nanoparticle Fe3O4, Fe3O4-NPs)、5溴汉防己甲素(5-bromotetrandrine, BrTet)单独以及联合应用对人慢性粒细胞白血病急性红白血病变耐药细胞株K562/A02多药耐药性的逆转作用,并探讨它们逆转多药耐药的机理,为Fe3O4-NPs和BrTet协同作为耐药逆转剂的临床应用提供理论依据。甲基四唑蓝(MTT)法检测Fe3O4-NPs、BrTet单独以及联合作用后,柔红霉素(Daunomycin,DNR)对细胞的半数抑制量(IC50),并计算逆转倍数(FR);流式细胞仪(FCM)法检测K562细胞和Fe3O4-MNPs、BrTet单独以及联合作用K562/A02细胞内DNR浓度;Real time 逆转录PCR检测K562细胞和Fe3O4-NPs、BrTet单独以及联合作用K562/A02细胞后mrp1, mrp2, mrp4, mrp5 mRNA水平变化;Western blot检测K562细胞和Fe3O4-NPs、BrTet单独以及联合作用K562/A02细胞后MRP1, MRP2, MRP4, MRP5蛋白水平的变化。结果显示:Fe3O4-NPs和BrTet在有效浓度范围内联合应用可以有效增强DNR对耐药细胞的细胞毒作用。并且该有效浓度的Fe3O4-NPs和BrTet明显增加K562/A02细胞内DNR浓度,与Fe3O4-NPs、BrTet单独作用相比,差异具有显著性。Western blotting和实时逆转录PCR结果显示:Fe3O4-NPs和BrTet在有效逆转浓度时不同程度上降低了MRP1,MRP2的蛋白以及mRNA过度表达,与Fe3O4-NPs、BrTet单独作用相比,差异具有显著性。有效逆转浓度的Fe3O4-NPs和BrTet单独以及联合应用均可逆转耐药,且两药联合逆转作用最强,其逆转机制可能与抑制MRPs的表达、增加细胞内化疗药物蓄积有关。并且两药联合不增加化疗药物对正常细胞的毒性作用,显示较好的靶向性。
关键词: 四氧化三铁纳米颗粒 5溴汉防己甲素 多药耐药 K562/A02
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