所有作者:邹扬 樊均明
作者单位:四川大学华西医院肾内科
论文摘要:目的:已知转化生长因子β1与肾脏组织纤维化形成有密切关系。拟进一步探讨转化生长因子β1对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)中基质细胞衍生因子1表达的影响。方法:实验于2006-03/2007-05在四川大学生物治疗国家重点实验室神经分子生物实验室完成。①实验材料:大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK52E,由澳大利亚Monash医学中心肾内科实验室提供;转化生长因子β1由cytolab公司提供。②实验分组:将大鼠近端肾小管上皮细胞分为正常对照组:无转化生长因子β1干预;实验组:又分为在同一转化生长因子β1浓度(2μg/L)下,培养6,12,24 h;在不同的转化生长因子β1浓度(2,5,10μg/L)下,培养24 h。③利用免疫细胞化学技术对同一转化生长因子β1浓度(2μg/L)干预不同时间后的大鼠近端肾小管上皮细胞中基质细胞衍生因子1的蛋白表达进行半定量分析,选择出最佳的作用时间点;通过反转录-聚合酶链反应、Western-Blotting以检测大鼠近端肾小管上皮细胞中基质细胞衍生因子1在不同转化生长因子β1浓度干预下培养24 h后的mRNA、蛋白表达变化情况。结果:①培养12,24 h时,大鼠近端肾小管上皮细胞中基质细胞衍生因子1的蛋白表达比0 h增高(P0。05)。提示,基质细胞衍生因子1的表达到达一平台期,24 h为最佳的作用时间点。②从mRNA水平和蛋白水平均证实,2μg/L转化生长因子β1干预24 h后的大鼠近端肾小管上皮细胞中基质细胞衍生因子1的表达高于正常对照组(P
关键词: 转化生长因子β 基质细胞衍生因子-1 肾小管上皮细胞
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