所有作者:刘海平 钱其军
作者单位:浙江理工大学生命科学学院
论文摘要:目的:构建携带全长抗体AT2腺病毒载体,并检测其表达的抗体的特性。方法:我们首先构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)抗原的全长抗体AT2基因的穿梭载体后,与5型腺病毒骨架质粒pBHGE3重组得到重组腺病毒Ad5-AT2。利用密码子的偏爱性修改部分抗体基因密码子以提高抗体表达,构建得到新的重组腺病毒Ad5-NAT2。把两种病毒分别感染293细胞,用ELISA法检测抗体的表达量、Western和IFA检测全长抗体的完整性和特异性。结果:腺病毒载体表达的抗体与商品化AT2抗体性质相近,是完整的,能与EGFR阳性细胞表面的抗原特异性结合,通过修改氨基酸密码子提高了抗体的表达量。结论:成功构建携带全长抗体腺病毒载体,并且表达的抗体是完整的和有活性的。
关键词: 全长抗体 基因治疗 重组腺病毒 表皮生长因子受体
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