所有作者：郑煜煌 刘纯 何艳 周华英
作者单位：中南大学湘雅二医院艾滋病研究室
论文摘要：目 的 研究带有不同变异位点的艾滋病病毒１型（HIV-１）vpr基因，对感染细胞周期和凋亡的影响，以及其致细胞周期变化和致细胞凋亡的机制两者间的可能关系。方法 将１４个带有HIV-１ vpr基因片段的pcDNA３。１（+）真核表达载体构建重组质粒，将其转染Hela细胞，并设立保守株vp r基因转染细胞、突变株 vpr-FS基因转染细胞、空载体转染细胞和未转染细胞作为对照，经RT-PCR检测目的基因转染成功后，经Pi染色用流式细胞仪检测被转染细胞的细胞周期分布和细胞凋亡率。结 果 １４个带有不同变异位点的HIV-１ vpr基因片段的Hela细胞，经流式细胞仪检测显示出不同的致细胞周期阻滞和致凋亡的能力。发现转染保守片段HIV-１ vpr的Hela细胞，其细胞周期出现G２期阻滞和细胞凋亡率明显升高，但转染vpr C末端截断的vpr-Fs片段的细胞、空载体pcDNA３。１（+）转染细胞和未转染的hala细胞无此现象。转染了HIV-１ vpr基因序列相对应的Vpr蛋白中含有７０V， ８５P， ８６G， ９４G突变的片段，较vpr保守片段其致感染细胞G２期阻滞和凋亡的能力明显下降。初步发现vpr诱导G２期阻滞百分比越高其所致凋亡率越高。结 论 HIV-１vpr基因有明显的致感染细胞G２周期阻滞和致细胞凋亡的作用，但 vpr C末端截断的vpr-Fs片段无此功能。说明中国感染者HIV-１ vpr基因表达蛋白的７０V，８５P， ８６G， ９４G位点突变能使其致感染细胞G２期阻滞和凋亡的能力下降。 分析显示vpr诱导G２期阻滞的程度与其致凋亡水平可能相关，提示两者的发生机制可能有一定的关联。本研究为进一步探讨HIV-１致病机制和探索可能的基因干预措施打下基础。
关键词： HIV-1 基因 vpr 细胞周期 细胞凋亡
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