所有作者：窦丽芳 胡丽华 李一荣
作者单位：华中科技大学临床检验诊断学
论文摘要：目的 研究人P２１WAF基因对人胃癌细胞株AGS细胞survivin基因，以及htert、TRF１、TRF２和hPOT１等端粒相关基因表达水平的影响。方法 采用亚克隆技术构建pEGFP-C２-P２１真核表达质粒，经脂质体介导和G４１８筛选将pEGFP-C２-P２１稳定转染AGS细胞；荧光显微镜观察报告基因pEGFP发出绿色荧光判定P２１在AGS的细胞定位；流式细胞术分析细胞周期；实时荧光定量PCR技术检测AGS细胞P２１WAF、survivin、端粒相关基因htert、TRF１、TRF２及hPOT１ mRNA表达水平。结果 P２１WAF在AGS细胞稳定表达且主要定位于细胞核；细胞周期分析显示稳定转染P２１WAF基因AGS细胞阻滞于G１/S期；mRNA显示转染pEGFP-C２-P２１的P２１WAF 、survivin、htert、TRF１、TRF２及hPOT１基因mRNA分别为转染pEGFP-C２的３２４倍、１。６％、９５％、９７％、１０２％及９９％。 结论 P２１WAF基因在AGS细胞成功高表达使细胞周期阻滞于G１/S期，可能通过调控细胞周期在转录水平抑制survivin基因表达水平，但对端粒相关基因htert、TRF１、TRF２和hPOT１的转录水平可能不起调控作用。
关键词： P21 survivin htert 细胞周期 人胃癌细胞株AGS
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