重组载体pIRES2-EGFP-VEGF的构建及对内皮细胞的转染

论文发布时间：[2010-02-02] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：于彩平王贵学唐朝君

作者单位：生物流变科学与技术教育部重点实验室,重庆大学生物工程学院

论文摘要：内皮细胞生长因子(VEGF)是一种促进细胞分裂和增殖的糖蛋白，能显著加快内皮细胞的生长，而绿色荧光蛋白(GFP)作为一种常用的标记分子，能在转染后的细胞中持续表达并发光。本研究将VEGF１２１基因插入pIRES２-EGFP载体中构建重组载体pIRES２-EGFP- VEGF，并将重组载体转染到内皮细胞中以观察其对内皮细胞生长的影响。PCR扩增得到VEGF１２１基因５７６ bp的编码序列，测序验证后插入到携带绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pIRES２-EGFP中。将pIRES２-EGFP-VEGF 用Lipofectamine ２０００对内皮细胞进行转染，筛选鉴定后表明GFP表达，可观察到绿色荧光，抗性筛选后测得细胞生长明显加快。实验结果表明，重组载体pIRES２-EGFP- VEGF１２１成功转染内皮细胞并加快了内皮细胞的生长速度。

关键词：内皮细胞 VEGF121 转染

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