所有作者：缪爱珠 卢奕
作者单位：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科
论文摘要：目的 利用蛋白质组学研方法研究HSF４b基因突变(３４８位核苷酸T突变为C)对人晶状体上皮细胞蛋白表达的影响。方法 培养人晶体上皮细胞株SRA０１/０４，对含人HSF４b基因的质粒pcDNA３。１-HSF４b进行定点突变，NUucleoBond Xtra Main试剂盒进行质粒抽提，脂质体转染人晶状体上皮细胞(pcDNA３。１-HSF４b，突变的pcDNA３。１-HSF４b，空载体pcDNA３。１)，提取四组细胞总蛋白（经过转染的三组细胞和空白细胞），胰酶消化蛋白，iTRAQ试剂盒标记肽段，液相色谱串联质谱鉴定方法定量分析并寻找差异蛋白。结果 共鉴定出１０４种蛋白，转染突变pcDNA３。１-HSF４b的细胞分别与其他三组细胞相比，共有２０种蛋白发生了上调，１４种蛋白发生了下调；以转染空载体组为对照，转染突变HSF４b基因组细胞和转染正常HSF４b组细胞分别有１２和１４种蛋白的表达量发生改变，其中纽带蛋白均有上调，蛋白S１００-A１３均有下调。结论 HSF４b突变(３４８位核苷酸T突变为C)以后，质粒转染人晶状体上皮细胞，能引起部分细胞蛋白表达量的改变，这些蛋白和热休克反应，细胞分化，蛋白质合成，DNA结合等功能有关。
关键词： 热休克转录因子4b 人晶状体上皮细胞 iTRAQ 定量蛋白质组学
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