遗传性白内障小鼠晶状体的比较蛋白质组学分析

论文发布时间：[2010-02-04] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：季樱红卢奕李娜金红杨芃原孔祥银燕顺生

作者单位：复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科，上海

论文摘要：目的：比较研究先天性遗传性白内障的晶状体蛋白质表达谱的改变方法：采用自发的Crygs基因突变先天性隐性遗传白内障小鼠模型，分别提取白内障与正常小鼠晶状体总蛋白，进行固相PH梯度（IPG）等电聚焦双向电泳，R－２５０染色，使用PDQuest ７。３０图像分析软件分析电泳图像。选择部分差异蛋白点胶上酶解，应用MALDI-TOF/TOF仪器进行串联质谱（MS/MS）鉴定及分析。结果：上样量为８８２μg时，白内障和正常小鼠分别检测到４１７±５３个蛋白点（n=３）和３７０±４１个蛋白点（n=３）。上样量为１９０μg时，白内障和正常小鼠分别检测到６０±７个蛋白点和５７±５个蛋白点（n=３）。对γS、BFSP/filensin、γF、βA１、βB１、βB２和αB等７种差异蛋白进行了鉴定。突变小鼠晶状体正常γS、念珠状纤维结构蛋白（BFSP/filensin）缺失，γF表达下调（４倍），分子量比正常小，提示βA１、βB１、βB２和αB可能发生裂解。结论：蛋白质的双向电泳和质谱分析有助于基因突变后下游蛋白的功能分析。Crygs基因突变导致γS晶状体蛋白的异常，并引起细胞骨架蛋白（BFSP/filensin）和其它晶状体蛋白（γF、βA１、βB１、βB２和αB等）继发改变，从而间接诱发白内障。

关键词：小鼠晶体蛋白蛋白质组双向凝胶电泳质谱

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