6B11抗独特型单链抗体－热休克蛋白70融合蛋白诱导抗卵巢癌免疫应答的体外实验研究

论文发布时间：[2010-02-08] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：刘春雨崔恒昌晓红叶雪付天云程洪艳张果熊英成夜霞张丽赵旸

作者单位：北京大学人民医院妇科肿瘤中心

论文摘要：目的：既往研究证实，６B１１抗独特型单链抗体（６B１１ScFv）具有模拟卵巢癌相关抗原OC１６６-９的作用。本文研究６B１１ScFv与小鼠热休克蛋白７０（mHSP７０）构建而成的融合蛋白（６B１１ScFv-mHSP７０）在体外抗卵巢癌免疫应答，探讨其作为卵巢癌疫苗的可能性。方法：以大肠杆菌表达６B１１ScFv-mHSP７０融合蛋白，经变性复性后纯度达９５％。采用ELISA、竞争抑制实验检测其免疫学活性。选择HLA-A２阳性的女性健康志愿者，采集其外周血单个核细胞，用６B１１ScFv-mHSP７０刺激并培养。采用CCK-８法、LDH释放法分别观察淋巴细胞增殖情况和对卵巢癌细胞系的细胞毒作用，流式细胞术检测６B１１ScFv-mHSP７０刺激前后淋巴细胞表型的改变。结果：６B１１ScFv-mHSP７０具有特异性结合卵巢癌单抗COC１６６-９及抗小鼠－HSP７０抗体的双重免疫学活性；可以刺激人外周血淋巴细胞的增殖；并对HLA-A２阳性、OC１６６-９表达阳性的卵巢癌细胞系有细胞毒作用；经６B１１ScFv-mHSP７０刺激后，实验组的淋巴细胞表型与未经蛋白刺激的对照组相比：CD４+T的细胞明显增加，CD８+T的细胞略有增加。CD４+/CD８+的比率明显增加，CD４+CD２５+T细胞占CD４+T细胞的比率明显下降，差异有统计学意义。结论：６B１１ScFv-mHSP７０融合蛋白在体外可诱导特异性抗卵巢癌的细胞免疫反应，有可能作为抗独特型疫苗用于卵巢癌的主动免疫。

关键词：抗独特型抗体热休克蛋白融合蛋白卵巢癌

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