带c-Myc标签的Mdfic的真核表达载体构建及其在成肌细胞中的表达

论文发布时间：[2010-01-14] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：郭芬李月琴黄晓峰欧淑芳初彦辉周天鸿

作者单位：广东药学院生命科学与生物制药学院

论文摘要：目的构建新型转录因子Mdfic和c-Myc标签融合表达的真核表达载体pcDNA３。１-Mdfic-Myc，实现其在成肌细胞C２C１２中的表达。方法 PCR方法扩增Mdfic的开放阅读框，酶切后的PCR扩增产物和退火后的人工合成的c-Myc标签共同克隆至pcDNA３。１（+）真核表达载体中，构建pcDNA３。１-Mdfic-Myc融合表达质粒。重组质粒经过PCR、双酶切和测序鉴定后，脂质体法转染C２C１２细胞。RT-PCR和western blotting方法检测转染后细胞中Mdfic-Myc的表达。结果成功构建了pcDNA-Mdfic-Myc真核表达质粒；RT-PCR和western blotting结果表明， Mdfic-Myc融合蛋白在成肌细胞C２C１２中获得高效表达。结论 pcDNA３。１-Mdfic-Myc融合表达质粒的成功构建及其在成肌细胞中的表达为进一步体外研究Mdfic蛋白单独的功能及其与其他分子间功能性相互作用奠定了基础。

关键词： Mdfic 真核表达载体基因表达

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