所有作者:陈文嘉 龙欢 龙勤强 钱涛 杨在清
作者单位:华中农业大学生命科学技术学院
论文摘要:本文以梅山猪为研究对象,首先对猪LDLR家族ApoER2和VLDLR基因进行了基因克隆,获得了猪ApoER2的后段编码区1176bp和VLDLR的全长编码区2538bp。检索到了VLDLR的全基因组序列,并阐明了其十八个外显子和十七个内含子的基因结构,还分析了其5’-UTR序列转录起始位点、核心启动子区和可能存在的转录因子应答元件。利用辐射杂种板技术将猪ApoER2定位在6q31-35,将猪VLDLR定位在1q21-27。实时荧光定量PCR分析表明,猪ApoER2主要在大脑、小脑和睾丸中表达,其他组织表达量较少;VLDLR在除肝脏和肌肉外的各组织表达都较高。此外,用ApoER2和VLDLR的配体reelin刺激培养的猪肾细胞系,通过实时荧光定量PCR方法检测刺激后不同时间点ApoER2和VLDLR mRNA相对表达量,研究了ApoER2和VLDLR在响应reelin信号后的表达变化,发现ApoER2和VLDLR在响应reelin信号后的基因表达并不同步,说明它们在reelin信号途径中的分子机制可能是不相同的。
关键词: 梅山猪 ApoER2 VLDLR 基因克隆 启动子 表达谱 reelin信号途径
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