所有作者:徐佳楠 陈建平 许颖 王昕
作者单位:四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室
论文摘要:目的 纯化嗜肺军团菌pilE基因编码的Ⅳ型菌毛蛋白PILE。检测在呼吸道疾病患者和健康人体检血清中是否存在嗜肺军团菌特异性抗体的表达,了解纯化蛋白PILE在嗜肺军团菌病诊断中的应用价值。方法 使用HisTrapTM HP亲和层析柱纯化Ⅳ型菌毛蛋白PILE,并对纯化蛋白进行SDS-PAGE和Westernblot鉴定。分别以嗜肺军团菌Lp1、Lp10型菌株全菌蛋白及纯化蛋白PILE作为包被抗原,间接ELISA法检测呼吸道疾病患者和健康人体检血清中是否存在嗜肺军团菌特异性抗体的表达。结果 纯化出约35。7kDa大小的目标蛋白,在所检测的呼吸道疾病患者和健康人体检血清中均有嗜肺军团菌特异性抗体阳性出现。用全菌蛋白检测健康人群军团菌抗体阳性率为20%, 呼吸道疾病患者阳性率为20。51%;用纯化蛋白检测健康人群军团菌抗体阳性率为10%, 呼吸道疾病患者阳性率为10。27%。结论 成功纯化了Ⅳ型菌毛蛋白PILE,初步建立了一种以Ⅳ型菌毛蛋白PILE为包被抗原的诊断嗜肺军团菌病的ELISA检测方法。
关键词: 嗜肺军团菌 Ⅳ型菌毛蛋白 纯化 诊断
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