沪杭地区番茄上黄瓜花叶病毒基因多态性的研究

论文发布时间：[2010-01-20] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：王晓明陈绍宁陈集双

作者单位：浙江理工大学生物工程研究所

论文摘要：番茄病毒病是危害我国番茄产量与质量的主要原因，导致我国番茄病毒病的主要病毒为黄瓜花叶病毒（CMV)和番茄花叶病毒(ToMV)，二者可以单独侵染也可以复合侵染。番茄病毒病的发生与病毒种类、地域和季节具有相关性。本研究于夏秋两季在沪杭地区不同地点采集具有差异性症状的田间番茄样品，利用多重RT-PCR方法、ELISA检测侵染番茄的病毒，并对主要毒源CMV进行酶切图谱差异性分析，进而对几类典型CMV分离物应用dsRNA-SPAT方法克隆测序并进行序列分析。本文运用以植物１８S rRNA为内参的多重RT-PCR方法，同时检测CMVⅠ、CMVⅡ及其携带的sat RNA，以及TMV和ToMV多种病毒，实现了属间检测。通过与DAS-ELISA检测结果及灵敏性试验比较，说明多重RT-PCR为一种灵敏性高，准确度好的检测方法。基于RT-PCR方法的限制性酶切分析，不仅可以鉴定CMV亚组I和亚组II株系之间的复合侵染，也可以对不同CMV株系的三条基因组RNA链进行快速分组鉴定，检测是否存在天然假重组现象。研究表明，侵染沪杭地区田间番茄的主要毒源为CMV和ToMV，既有单独侵染，也有复合侵染；CMV所占比例较大，其中CMV亚组Ⅰ占明显优势，且主要为CMV亚组ⅠB，CMV亚组ⅠA比例较小；CMV亚组Ⅱ在我国的分布呈上升趋势；天然假重组体发生概率很小。

关键词：番茄黄瓜花叶病毒多重RT-PCR 限制性酶切同源性分析

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