重组毕赤酵母表达血管紧张素转化酶C-结构域高密度发酵的条件优化

论文发布时间：[2010-01-13] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：徐珏杜方尧许传莲

作者单位：浙江理工大学生命科学学院蛋白质组与分子酶学实验室

论文摘要：血管紧张素转化酶（ACE， EC３。４。１５。１）在调节血压方面具有重要作用，研究证实，ACE的C结构域（C-ACE）是体内血管紧张素I分解的主要活性位点。在５ L 发酵罐中，对重组毕赤酵母表达C-ACE的发酵工艺进行了研究。探讨不同诱导因素对菌体的生长以及重组蛋白表达和酶活力的影响。结果表明，当工业培养基添加２％蛋白胨为氮源时，C-ACE的降解现象得到了有效控制；采用诱导温度为２６℃， pH５。５，甲醇含量为１。５％的表达条件，C-ACE表达量和酶活力分别达到４４６mg/L和３８。２U/mL。通过Ni-NTA柱层析纯化，使C-ACE的比活力较原来提高７倍，为８６U/mg，为筛选专一性更强的C-ACE抑制剂奠定了基础。

关键词：毕赤酵母血管紧张素转化酶C-结构域目的蛋白降解发酵

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