PRRSV NSP2基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定

论文发布时间：[2010-01-11] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：宋艳华王海燕李文良李军星李玉峰王先炜姜平

作者单位：南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

论文摘要：根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) S１、SY０６０８株NSP２基因序列保守区设计引物，通过RT-PCR扩增出两毒株的NSP２基因，克隆到pFastBacTM HT B杆状病毒载体中，将筛选的阳性重组载体pF-S１-NSP２和pF-SY-NSP２，分别转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH１０Bac感受态大肠杆菌中，经蓝白菌落筛选和PCR鉴定，获得重组表达载体rBac-S１-NSP２和rBac-SY-NSP２。在脂质体介导下转染Sf９昆虫细胞，获得重组杆状病毒rAc-S１-NSP２和rAc-SY-NSP２，Western-blot和间接免疫荧光实验结果表明，本研究成功构建了表达PRRSV S１和SY０６０８株NSP２蛋白的重组杆状病毒，表达的蛋白与自然感染PRRSV的猪血清均具有良好的反应原性，为进一步研究NSP２蛋白的功能及生物学和免疫学特性奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2 杆状病毒表达

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