层理鞭枝藻藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白β亚基Cys-155的藻胆色素共价偶联

论文发布时间：[2010-01-25] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：张娟夏坤周明

作者单位：华中科技大学环境科学与工程学院

论文摘要：层理鞭枝藻（Mastigocladus laminosus PCC７６０３）藻蓝蛋白-CPC和藻红蓝蛋白-PEC中均存在２个藻胆色素结合位点（Cys-８４和Cys-１５５），可与藻蓝胆素(简称PCB)发生共价偶联反应，已有研究证实编码基因为alr０６１７的裂合酶CpcS１是催化Cys-８４与PCB共价偶联的裂合酶。在研究Cys-１５５与PCB共价偶联的过程中，通过BLAST软件同源性对比分析后，筛选出４个基因：cpcT１、cpcT２、cpcS１、cpcS２，其中基因cpcT１和cpcS２根据实验需要克隆到载体pCDFDuet上，通过DNA电泳和蛋白质电泳挑选出正确的克隆。此４个基因对应的质粒与在大肠杆菌内生成PCB必需的质粒pACYCDuet-ho１-pcyA，以及质粒pET-cpcB(C８４S)或pET-pecB(C８４A)，共同转入大肠杆菌BL２１(DE３)内，进行体内重组，得到各重组蛋白，经过亲和层析柱提纯并透析后的蛋白经过活性比较、荧光和紫外吸收光谱等鉴定，确定编码基因为all５３３９的裂合酶CpcT１能高效地催化Cys-１５５与PCB共价偶联，而其余３个基因不能起到催化作用。由此，能催化脱辅基蛋白β-CPC和-PEC的两个位点共价偶联PCB的裂合酶均被发现。

关键词：藻蓝蛋白-CPC 藻红蓝蛋白-PEC 裂合酶CpcT1 体内重组

免费下载《层理鞭枝藻藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白β亚基Cys-155的藻胆色素共价偶联》PDF全文（已停止下载）
　　本站“论文下载”文章收集整理于“中国科技论文在线”，由于各种原因，本站已暂停论文下载！请前往“中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn/”免费下载！

〖返回环境科学论文列表〗

下一篇：生物表面活性剂对城市污泥堆肥过程的影响