所有作者：董燕 来慧丽 张雅明 周联 王培训
作者单位：广州中医药大学免疫与分子生物学技术研究室
论文摘要：【目的】建立鱼腥草离体再生系统和农杆菌介导的遗传转化方法，为鱼腥草转基因新品种选育、种质资源优化奠定基础。【方法】以鱼腥草叶片为外植体置于不同激素配比的MS培养基上，进行愈伤组织诱导和分化再生；以根癌农杆菌EHA１０５/pCAMBIA１３０５。２进行转化，将外源GUS（β-葡萄糖醛糖苷酶）基因、潮霉素抗性基因转入鱼腥草，以组织化学染色法检测GUS活性，以PCR法鉴定基因组中的GUS基因。【结果】 MS培养基中添加０。１mg/L NAA、２。０mg/L ６-BA、０。５mg/L KT适于鱼腥草叶圆片为外植体进行离体再生，出芽率达９６。７％。潮霉素作为筛选试剂，浓度为２。５mg/L；头孢霉素作为抑菌剂，浓度为２５０ mg/L。经感染的外植体中GUS 反应呈阳性的占７５。０ ％；８周统计抗性芽比率５。５％，PCR分析表明GUS基因已整合到鱼腥草基因组中。【结论】通过鱼腥草离体培养条件的研究及根癌农杆菌介导的遗传转化，获得了较高的离体再生频率，实现了鱼腥草的遗传转化。
关键词： 鱼腥草 离体再生 遗传转化 根癌农杆菌 GUS基因
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