家蚕OCIAD2蛋白的表达分析及其亚细胞定位

论文发布时间：[2009-12-15] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：韩聪张耀洲

作者单位：浙江理工大学生物化学研究所

论文摘要：通过筛选本实验室家蚕cDNA文库，得到一条编码OCIAD２蛋白的cDNA序列，基因登录号为：DQ４４３３８５，我们将其命名为BmOCIAD２(Bombyx mori ociad protein isoform ２)。该序列的ORF为６４５ bp，编码２１４个氨基酸残基，由五个外显子和四个内含子剪接而成。该基因编码的蛋白含有一个完整的OCIA超家族保守结构域，与赤拟古盗、果蝇、埃及伊蚊等的相似蛋白同源性超过３０％。表达并纯化带有His标签的BmOCIAD２蛋白，用纯化的重组蛋白免疫新西兰兔获得多克隆抗体。Western blot检测显示BmOCIAD２蛋白在家蚕的卵、幼虫、蛹、蛾四个生长时期以及五龄幼虫的睾丸、马氏管、卵巢、气门、脂肪体等组织中有差异表达。另外，实时荧光定量PCR结果表明，BmOCIAD２ mRNA在家蚕的各个发育时期及五龄幼虫各组织中以蛹期和睾丸中的转录水平最高。通过免疫细胞化学方法分析了BmOCIAD２在家蚕BmN细胞中的分布情况，结果显示BmOCIAD２主要存在于细胞膜上。

关键词：家蚕 BmOCIAD2 表达分析实时荧光定量PCR 亚细胞定位

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