超强毒IBDV VP2基因原核表达及表达产物免疫原性的检测

论文发布时间：[2009-12-30] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：朱彩霞朱瑞良刘冠华翁立雪马荣德孙寅剑

作者单位：山东农业大学动物科技学院

论文摘要：利用RT-PCR方法扩增IBDV的结构蛋白VP２基因，并将其克隆到表达载体PGEX-４T-３中，获得重组质粒命名为PGEX-VP２，经PCR、酶切和序列分析鉴定表明插入的位置、大小和读码框均正确。SDS- PAGE电泳检测表明，经重组质粒PGEX-VP２转化、诱导的受体菌E。 coli BL２１(DE３)plysS能表达结构蛋白VP２基因，并以包涵体形式存在，约６９KDa，表达的蛋白经纯化后，免疫６周龄BALB /c小鼠，ELISA分析表明制备的抗血清效价在１∶５１２０以上，Western blot分析表明VP２表达产物能与IBDV多克隆抗血清发生反应，从而证明超强毒IBDV VP２基因在原核中得到了表达、表达产物具有良好的免疫原性。这为研究超强毒IBDV的免疫机理及基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。

关键词： IBDV VP2基因 E. coli BL21(DE3)plysS 表达免疫原性

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