所有作者：梁丹军 郑碧 陈剑清 张耀洲
作者单位：浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所
论文摘要：从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中获得一条基因序列，经NCBI序列比对后推测该基因编码Sir２相关蛋白，将其命名为BmSir２。该基因ORF全长１１６４ bp，编码３８７个氨基酸残基，GenBank登录号为NM００１０４３４７２。BmSir２蛋白含有一个SIR２超级族中SIRT１结构域，预测该蛋白分子量为４３。３７ kD，等电点为４。９４。我们将BmSir２基因克隆到pET-２８a（+）载体中，并转化到大肠杆菌Rosetta细胞在IPTG诱导下成功表达。重组蛋白BmSir２经镍柱纯化后得到高纯度的重组蛋白，并用此免疫雄性新西兰兔，制备多克隆抗体。将家蚕各发育时期和五龄期各组织的总蛋白用自制的多克隆抗体进行检测，了解BmSir２在家蚕各时期和各组织的表达情况。实验结果表明，BmSir２在家蚕卵、蛹、蛾、五龄幼虫期都有表达但表达量不一，在卵期表达量最高，五龄期最少。因此推测该蛋白在家蚕整个生长周期中都具有重要作用。在五龄幼虫各组织中BmSir２表达情况的差异也很明显，该蛋白只在丝腺中部、脂肪体、气管和头部等组织中有明显表达，在其它组织中则没有明显的表达信号。对家蚕BmN细胞进行免疫细胞化学实验，结果显示，BmSir２主要分布在细胞质中，在细胞核内也有少量定位。
关键词： 家蚕 Sir2相关蛋白 原核表达 组织定位 亚细胞定位
免费下载《家蚕BmSir2的表达分析及亚细胞定位》PDF全文（已停止下载）
本站“论文下载”文章收集整理于“中国科技论文在线”，由于各种原因，本站已暂停论文下载！请前往“中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn/”免费下载！
指出，范文大全立刻进行改正或删除有关内容! 
当前位置：