RACE策略克隆鹅抗体轻链基因及分析

论文发布时间：[2009-12-08] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：吕雪峰李志慧刘钧松王茹丽

作者单位：吉林省畜牧兽医科学研究院

论文摘要：目的：在已克隆鹅源抗鹅细小病毒抗体可变区基因的基础上，探索克隆全部抗体轻链基因的成熟方法，为构建单链抗体及体内定位诊断方法研究打基础。方法：从经鹅细小病毒免疫的鹅脾脏，提取脾脏淋巴细胞全RNA，使用SUPERSCRIPT II RT酶和引物GSP-１对总RNA进行目的基因第一链cDNA的合成，进行３’和５’RACE试验，应用相应的巢式PCR，鉴定后直接与pMD１８-T质粒载体连接，转化感受态大肠杆菌DH５α，提重组质粒经PCR鉴定、酶切鉴定后进行序列测定和分析。结果：成功获得的鹅抗体轻链全基因序列符合抗体可变区序列特征。结论：成功克隆抗鹅细小病毒鹅抗体轻链基因序列。

关键词：鹅抗体轻链测序

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