所有作者:张春丽 张耀洲 郑青亮 王丹
作者单位:浙江理工大学生生命科学学院
论文摘要:从本实验室构建的家蚕蛹cDNA 文库中,筛选到一编码家蚕中类孕酮膜受体元件2蛋白的基因序列,基因登陆号为lcl|32723。比对分析该序列编码蛋白可能是细胞内质膜上孕酮受体的一个组分,在调节孕酮在细胞内的功能方面有重要的作用。为了研究这个蛋白在家蚕体内的作用,我们在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达、纯化了带有His 标签的PGRMC2融合蛋白,并制备了多克隆抗体。通过Western blot检测到PGRMC2蛋白在家蚕五龄幼虫的头、丝腺、气门、卵巢、睾丸、脂肪体等组织中都有表达,其中头部、睾丸、卵巢中表达量较高,表明这个蛋白在家蚕的生殖活动中发挥一定的作用。笔者也通过Western blot检测家蚕各发育时期PGRMC2的表达情况,发现随着家蚕的发育PGRMC2的表达量增加,表明这个蛋白在家蚕的发育过程中起着重要的作用。
关键词: 家蚕 孕酮膜受体元件2 原核融合蛋白表达与纯化 Western-blotting RT-PCR
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