嗜热菌苹果酸脱氢酶基因的表达与酶学性质研究

论文发布时间：[2009-11-16] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：刘俊吕正兵孟凡国张耀洲

作者单位：浙江理工大学生命科学学院生化所

论文摘要：用PCR方法从嗜热栖热菌Thermus thermophilus HB２７中扩增出编码苹果酸脱氢酶基因，将其克隆到大肠杆菌( Escherichia coli)表达载体pET２８a(+)上，热击转化E。coli BL２１(DE３)，重组菌经 IPTG诱导表达可溶性目的蛋白，SDS-PAGE检测表达蛋白相对分子质量约为３５kDa，与预期分子量相符。通过热纯化，及亲和层析进行纯化，得到纯度大于９５％的蛋白质，接着进行相对活力，以及最适pH值和最适反应温度的测定，结果显示其最适pH为１１。５、最适反应温度为８０℃。

关键词：嗜热酶苹果酸脱氢酶表达酶学性质

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