所有作者：张传辉 赵群 杨军 李建军 孙仰白
作者单位：中国医科大学附属盛京医院
论文摘要：目的：观察IGF-１基因转染对兔脂肪间充质干细胞（ADSCs）增殖能力的影响，体外初步构建组织工程软骨。方法：取成年新西兰大耳白兔颈后部皮下脂肪组织，分离、培养兔ADSCs，构建稳定表达pcDNA３。１-IGF-１的细胞株，鉴定后，以５x１０^７/ml的密度接种于壳聚糖三维支架材料上。分组：A组为未转染基因的ADSCs-支架复合组，B组为A组体外IGF-１诱导培养，C组为稳定转染IGF-１基因的ADSCs-支架复合组，均培养一周。扫描电镜(SEM)观察各组细胞形态，MTT法绘制细胞增殖曲线，DIL荧光标记后观察细胞增殖比率及细胞分布，应用１，９-二甲基亚甲蓝（DMMB）法测定糖胺聚糖(GAG)含量。结果：１、成功构建稳定表达pcDNA３。１-IGF-１的细胞株，RT-PCR及Western blot检测证实转染后的细胞株在mRNA水平上获得IGF-１的表达，并且成功翻译为蛋白。２、扫描电镜示各组细胞在支架上贴附、伸展良好，C组细胞生长最为旺盛。３、MTT提示C组增殖能力最强，荧光标记显示细胞分布均匀，存活率高， PB>A，其中C组GAG含量明显高于对照组， P
关键词： 组织工程 胰岛素样生长因子-1（IGF-1） 脂肪间充质干细胞（ADSCs） 软骨细胞
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