所有作者:屈飞 秦晓群 向阳 谭宇蓉 刘惠君
作者单位:中南大学湘雅医学院生理学系
论文摘要:为了解慢性气道疾病中CFTR的异常情况,本文运用实时荧光定量PCR,western blot以及全细胞膜片钳技术观察在体内外支气管上皮CFTR的表达及CFTR cl-电流的变化。免疫荧光结果显示臭氧应激的大鼠支气管上皮顶膜及胞浆中CFTR明显减少。Real-time PCR结果显示,臭氧应激4h后,CFTR mRNA表达明显下降。免疫荧光显示臭氧处理后,CFTR在膜及胞浆均明显下降。Western blot 结果显示臭氧应激4h后,CFTR蛋白明显下降。全细胞膜片钳结果发现,在没有激动剂的情况下,记录的CFTR cl-电流很小,在加入5 µ;M forskolin,记录出明显的CFTR cl-电流,在forskolin 的基础上,可观察到臭氧应激4h后的BECs CFTR cl-电流下降。在随后的试验中,发现这种cl-电流能被CFTR cl-电流抑制剂glibenclamide 阻滞,而不能被非CFTR cl-电流抑制剂DIDS所阻断,说明记录出的cl-电流是CFTR cl-电流。以上结果提示CFTR的功能下调可导致慢性气道疾病中出现的CF症状。
关键词: 囊性纤维化跨膜转导调节因子 人支气管上皮细胞 臭氧应激 气道高反应性
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