所有作者:张传辉 赵群 杨军 李建军 孙仰白
作者单位:中国医科大学附属盛京医院
论文摘要:目的:观察IGF-1基因转染对兔脂肪间充质干细胞(ADSCs)HIF-1α和Sox-9表达的影响。方法:取成年新西兰大耳白兔颈后部皮下脂肪组织,分离、培养兔ADSCs,免疫荧光法鉴定后在脂质体介导下应用pcDNA3。1-IGF-1基因转染ADSCs,G418筛选,获得稳定转染的细胞株,RT-PCR及Western blot法检测转染后细胞中IGF-1的表达,MTT法绘制细胞增殖曲线,免疫荧光法分析转染后细胞HIF-1α和Sox-9的表达情况。结果:1、成功分离、培养兔ADSCs,细胞表面标志CD44和CD109均呈阳性反应。2、成功构建稳定表达pcDNA3。1-IGF-1的细胞株,RT-PCR及Western blot检测证实转染后的细胞株在mRNA水平上获得IGF-1的表达,并且成功翻译为蛋白。3、MTT提示转染后细胞增殖活性增强。4、转染后细胞的HIF-1α和Sox-9表达阳性。结论:IGF-1基因转染能够能够有效促进ADSCs增殖,并阳性表达Sox-9和HIF-1α。
关键词: 胰岛素样生长因子-1(IGF-1) 脂肪间充质干细胞(ADSCs) HIF-1 SOX-9
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