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锌转运体8自身抗体的放射配体检测法

论文发布时间:[2009-09-07]    范文大全    编辑:Voive.net

所有作者:黄干 罗说明 杨琳 李木文 潘玲玲 李霞 周智广

作者单位:中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所

论文摘要:目的 建立锌转运体8自身抗体(ZnT8A)的放射配体检测法(RLA)。 方法 采用重组人ZnT8质粒,经试管内转录与翻译,获得35S- ZnT8抗原,35S- ZnT8与血清在自制旋转孵育器上旋转温育后,用蛋白A-琼脂糖沉淀免疫复合物。免疫复合物经TBST缓冲液洗涤后,用多功能闪烁发光分析仪检测沉淀物放射性计数值。通过参加由国际糖尿病免疫学会(IDS)和美国疾病预防控制中心(CDC)联合举办的第六次糖尿病自身抗体国际标准化评估(DASP 2009),评价方法的灵敏度和特异性。并检测429例1型、855例2型糖尿病患者以及405例正常人ZnT8A水平,初步评价其临床应用价值。结果 该方法批内CV 3。9%~9。8%,批间CV4。3%~13。8%; DASP 2009显示,该方法灵敏度66%,特异性100%。受试者操作特性曲线(ROC)分析显示,曲线下面积为0。879±0。034;该方法阳性阈值ZnT8A指数为0。011(405例正常人的99%百分位点),检测1型糖尿病患者阳性率24。0%(103/429),显著高于2型糖尿病患者的1。3%(11/855)和健康人的0。99%(4/405)(2值分别为182。3和98。6,P均<0。0001)。结论 建立的RBA法检测ZnT8A敏感性高、特异性强、重复性好,可望应用于自身免疫糖尿病的诊断与分型。

关键词: 锌转运体8 自身抗体 放射配体检测法 1型糖尿病 2型糖尿病

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