紫穗槐-4,11-二烯合酶基因克隆及其在大肠杆菌和酿酒酵母中的表达

论文发布时间：[2009-08-10] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：孔建强沈君豪黄勇王伟程克棣朱平

作者单位：中国医学科学院&北京协和医学院

论文摘要：从青蒿中克隆得到紫穗槐-４，１１-二烯合酶（ADS）基因，该基因长为１６４１bp，编码５３７个氨基酸。将该基因分别克隆到大肠杆菌表达载体pET-３２a(+)和酿酒酵母表达载体pYeDP６０/G中，构建能表达ADS基因的大肠杆菌表达载体pETADS和酿酒酵母表达载体pYeDP６０/G/ADS。将pETAS导入大肠杆菌Bl２１(DE３)中进行诱导表达，SDS-PAGE和Western blot结果显示，该基因得到了表达，GC-MS对重组酶产物分析表明，FPP被ADS环化形成了紫穗槐-４，１１-二烯。将pYeDP６０/G/ADS转入酿酒酵母W３０３-１B中，获得含ADS基因的酿酒酵母工程菌，该酵母工程菌的发酵产物经GC-MS检测，除了检测到紫穗槐-４，１１-二烯外，还检测到了另外９种产物。

关键词：青蒿紫穗槐-4 11-二烯合酶大肠杆菌酿酒酵母 GC-MS

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