抗体夹心BGT-ELISA方法的建立及在转基因白桦中的应用

论文发布时间：[2009-06-26] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：曾凡锁骆薇王晓凤詹亚光孙东

作者单位：东北林业大学生命科学学院

论文摘要：本文以转基因白桦（Betula platyphylla Suk。）中蜘蛛杀虫肽与Bt-toxin C肽融合蛋白（BGT）基因的表达产物为研究目标，采用原核表达及纯化出融合蛋白His-BGT作为抗原进行兔免疫，得到相应的抗血清，采用ELISA法检测效价在１：１００００以上，并对抗血清进行了免疫亲和层析，获得了高纯度的IgG，Western blot检测具有较好的特异性。采用过碘酸钠法将抗体标记辣根过氧化物酶（HRP），得到第二抗体即酶标抗体，标记率在８５％以上。建立起检测BGT杀虫蛋白的快速、灵敏的方法。应用该检测方法，分析了５月份不同转基因白桦中BGT蛋白含量占叶片可溶性总蛋白含量的０。０５~０。３％，并利用Western blot验证了此方法是可靠的。

关键词：转基因白桦多克隆抗体酶标抗体 ELISA Western杂交

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